冯刚李向阳
贵阳医科大学
摘要：目的探讨虾青素油对小鼠免疫调节作用。方法测定刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发性变态反应(DTH),小鼠血清溶血素含量,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能,小鼠碳廓清能力,抗体生成细胞能力,小鼠自然杀伤细胞(NK)活性指标。结果与空白对照组比较,虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞增殖能力(0D值)显著增强(P<0.05),血清溶血素含量显著升高(P<0.05),小鼠碳廓清吞噬指数显著提高(P<0.01);高剂量组小鼠二硝基氟苯(DNFB)诱发的DTH显著增强(P<0.05);虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化(P<0.05),抗体生成细胞能力未明显增强(P<0.05),自然杀伤(NK)细胞活性未明显增强(P>0.05)。结论虾青素油具有增强免疫功能的作用。
关键词：虾青素油；细胞免疫；体液免疫；NK细胞
雨生红球藻属于绿藻门( Chlorophata )绿藻纲( hlorophyceae )团藻目( Volvocales )红球藻科( Haematococcaccae )红球藻属( Haematococcus，Ag )。雨生红球藻细胞内天然虾青素的含量相对较高，可达干重的 2％~5％[1] 。虾青素是一种叶黄素类胡萝卜素。是迄今为止人类发现的自然界最强的抗氧化剂之一，其清除自由基的能力是天然维生素 E 的 1000 倍，是天然β-胡萝卜素的 10 倍，是番茄红素的 7 倍。
通过整体实验观察，发现虾青素等类胡萝素均显著促进胸腺依赖抗原(TD-Ag)刺激时的抗体产生，分泌 IgM 和 IgG 的细胞数增加[2] 。Jyonochi 等 [3] 研究了虾青素和 β－胡萝素 2 种类胡萝素对小鼠淋巴细胞体外组织培养系统的免疫调节效应，结果表明类胡萝素的免疫调节作用与有无 VE 活性无关。虾青素的抗氧化作用能够保持机体的自稳态，从而保证细胞间隙的连接通讯正常发挥作用，进而促进淋巴细胞间的相互作用并分泌有免疫活性的细胞因子，最终表现为机体免疫能力的增强[4] 。今年来从雨生红球藻中提取虾青素得到虾青素油，虾青素油用于营养保健类产品开发研究逐渐增多。
本实验研究虾青素油对小鼠免疫调节作用。
01、材料与方法
动物 SPF 级昆明种雌性小鼠 160 只，体质量 18～22g，湖北省实验动物研究中心提供。
受试物 虾青素油 批号 20180124J，由上海莱雀生物科技有限公司提供，虾青素含量 5.10%
主要仪器 动物天平、分析天平、水浴锅、酶标仪、96 孔细胞培养板、离心机、游标卡尺等
实验分组及剂量 160 只小鼠随机分为四个大组，分别进行迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素；小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞；小鼠碳廓清；小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK 细胞活性实验。四个大组再分成 4 个小组，虾青素油高、中、低剂量组和对照组。剂量组分别灌胃虾青素油 8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW 和 51mg/kg·BW，对照组灌胃等体积大豆油。每日 1 次，灌胃体积为 0.1ml/10g，连续 30 天。
02、方法
动物适应环境5 天后，三个剂量组分别灌胃虾青素油 8.3mg/kg·BW、17mg/kg·BW和 51mg/kg·BW，对照组灌胃等体积大豆油。每日 1 次，灌胃体积为 0.1ml/10g，连续 30 天后处死小鼠。按照中国卫生部《保健食品审评与评价技术规范》2003版中“增强免疫功能实验检测方法”有关规定进行迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素；小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞；小鼠碳廓清；小鼠脾淋巴细胞转化实验、NK 细胞活性实验。
数据处理 采用 SAS 软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差表示，行 t检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。
03、实验结果
结果见表 1 至表 3。各组动物间体重增重、胸腺/体质量比值和脾脏/体质量比值无明显差异(P＞0.05)。与空白对照组比较，虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白 A(ConA)诱导的脾淋巴细胞增殖能力（0D 值）显著增强(P＜0.05) ，血清溶血素含量显著升高(P＜0.05)，小鼠碳廓清吞噬指数显著提高(P＜0.01)，高剂量组小鼠二硝基氟苯(DNFB)诱发的 DTH 显著增强(P＜0.05)；虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化(P＜0.05) ，抗体生成细胞能力未明显增强(P＜0.05)，自然杀伤(NK)细胞活性未明显增强( P＞0.05)。
04讨论
本实验显示，各组动物间体重增重、胸腺/体质量比值和脾脏/体质量比值无明显差异(P＞0.05)。与空白对照组比较，虾青素油中、高剂量组小鼠刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞增殖能力（0D 值）显著增强(P＜0.05) ，血清溶血素含量显著升高(P＜0.05)，小鼠碳廓清吞噬指数显著提高(P＜0.01)，高剂量组小鼠二硝基氟苯(DNFB)诱发的 DTH 显著增强(P＜0.05)；虾青素油各剂量组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬率、吞噬指数未明显变化(P＜0.05) ，抗体生成细胞能力未明显增强(P＜0.05)，自然杀伤(NK)细胞活性未明显增强( P＞0.05)。表明虾青素油对小鼠免疫调节具有正向作用，可提高小鼠免疫能力。
引用文献
1. 曹平华，李晓霞，禹学礼，等.雨生红球藻.饲料博览.2004 年第 11 期：42-43
2.JyonouchiH．Zhang I，Gross M eta1．Nutr．Cancer1994，21(1)：47
3.JyonouchiH．Hill R J．Tomita Yeta1 Nutr．Cancer．1991，16(2)：93～105
4.陈立武，曾维铨.虾青素抗肝肿瘤生长的实验研究.2012 年 2 月，第 9 卷第 4
期：21-23
